Desafio Profissional da Disciplina de Biologia Molecular. Aqui, você assume o papel de profissional responsável por analisar a situação, tomar decisões e propor soluções. É o momento de aplicar seus conhecimentos de forma prática e mostrar como lidaria com um desafio real.

ETAPA 1 - Apresentação do Desafio Profissional. O caso foi atendido por um profissional biomédico/farmacêutico clínico atuante no pronto-atendimento hospitalar, especializado em Hematologia Laboratorial e Farmácia Clínica. Durante o plantão, ele avaliou Juliana, uma jovem de 21 anos, estudante universitária, previamente hígida, que procurou atendimento devido a dor intensa, edema e vermelhidão na panturrilha esquerda há cerca de 48 horas. A paciente relatou também sensação de peso e calor na região afetada. Juliana negou traumas, cirurgias recentes, longos períodos de imobilização ou viagens prolongadas. No entanto, informou que iniciou um anticoncepcional oral combinado há três meses. Na história familiar, mencionou que seu pai apresentou um episódio de trombose aos 45 anos e sua tia paterna teve um evento recente de embolia pulmonar. O exame físico sugeriu um processo vascular agudo, e o ultrassom Doppler venoso confirmou a presença de um trombo em uma veia profunda do membro inferior. Diante da pouca idade da paciente, do fator de risco hormonal recente e do histórico familiar sugestivo, o hematologista optou por investigar uma possível condição hereditária subjacente que pudesse justificar o evento. Além dos exames de coagulação tradicionais, foi solicitado um teste molecular específico, utilizando a técnica de PCR seguida de digestão enzimática (PCR-RFLP), para avaliar uma possível mutação pontual em um gene associado ao aumento do risco de formação de trombos.

ETAPA 2 - Materiais de referência (ambientação) para o Desafio Profissional. LAUDO 1 - COAGULOGRAMA Material: Plasma citratado. Método: Coagulometria automática. Tempo de Protrombina: 12,6s (Valores de Referência: 10,0 – 13,5 s). INR: 1,02 (Valores de Referência: 0,8 – 1,2). TTPa: 31s (Valores de Referência: 25 – 36 s). Fibrinogênio: 395 mg/dL (Valores de Referência: 200 – 400 mg/dL). Dímero-D: 1.850 ng/mL (Valores de Referência: < 500 ng/mL). Plaquetas: 289.000/mm³ (Valores de Referência: 150.000 – 400.000). LAUDO 2 - INVESTIGAÇÃO DE TROMBOFILIA Material: Plasma e soro. Proteína C funcional: 89% (Valores de Referência: 70 – 140%). Proteína S livre: 78% (Valores de Referência: 60 – 140%). Antitrombina (AT III): 96% (Valores de Referência: 80 – 120%). Anticorpos anticardiolipina IgG: Negativo (Valores de Referência: < 20 GPL). Anticorpos anticardiolipina IgM: Negativo (Valores de Referência: < 20 MPL). Anticoagulante lúpico (LA): Negativo (Valores de Referência: - ). Homocisteína: 11 µmol/L (Valores de Referência: 5 – 15 µmol/L). LAUDO 3 - TESTE MOLECULAR (PCR-RFLP) Material: Sangue total em EDTA. Metodologia: PCR para amplificação do fragmento gênico alvo. Digestão enzimática com endonuclease MnlI. Análise eletroforética em gel de agarose. Controle interno positivo e negativo adequados. Resultado: POSITIVO PARA HETEROZIGOSE (G/A). Padrão eletroforético observado: Fragmento não digerido: 241 pb (alelo mutado). Fragmentos digeridos: 163 pb e 78 pb (alelo normal). Genótipo detectado: Fator V Leiden heterozigoto (G1691A). Referências e Links Disponibilizados: Acesse o laboratório virtual: Reação em Cadeia da Polimerase - PCR. Trombofilia genética em paciente com múltiplos episódios de trombose venosa profunda... (Link ScienceDirect) Variantes genéticas como fatores de risco para trombose venosa... (Link Lume UFRGS) Trombofilia, mutação do gene MTHFR, fator V Leiden, SAAF... (Link YouTube) Cascata da Coagulação (Link YouTube) Trombofilia na Gestação (Link YouTube) Dímero alto, o que fazer? (Link YouTube) Um método simples de extração de DNA genômico... (Link NCBI) PCR em tempo real (Link YouTube) A técnica de RFLP (Link YouTube) ETAPAS FINAIS

ETAPA 3 - Levantamento de conceitos teóricos (preencher no Template Padrão Único).

ETAPA 4 - Aplicação dos conceitos teóricos ao Desafio Profissional (preencher no Template Padrão Único).

ETAPA 5 - ETAPA AVALIATIVA - Redação do produto - Memorial Analítico (preencher no Template Padrão Único e, após a finalização, copiar e colar no campo de resposta a seguir). Chegou a hora de transformar todo o seu percurso investigativo em um texto claro, bem estruturado e objetivo. Você deverá desenvolver um Memorial Analítico. Ele será o produto final do Desafio Profissional, que será avaliado com nota de zero a dez e terá peso três na média final da disciplina de Biologia Molecular.